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中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所
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科研進(jìn)展

昆明植物所建立了一套全新的植物基因鏈接與克隆系統(tǒng)

文章來(lái)源:青高所昆明部  |  發(fā)布時(shí)間:2013-04-01  |  作者:胡向陽(yáng)  |  瀏覽次數(shù):  |  【打印】 【關(guān)閉

 

隨著高通量測(cè)序技術(shù)的普及與基因組信息爆炸式的增長(zhǎng),解析基因與基因組孕藏的功能信息成為我們了解生命密碼的必需步驟。功能基因研究是破解基因組信息這部天書的重要手段之一,而功能基因的研究離不開(kāi)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)基因方法。傳統(tǒng)的載體構(gòu)建耗時(shí)耗力,伴隨著煩瑣的酶切與連接手段,成功地構(gòu)建一個(gè)用于植物轉(zhuǎn)化的載體往往需要幾天甚至幾個(gè)星期的時(shí)間,有時(shí)操作人員因?yàn)檎也坏竭m合的酶切位點(diǎn)而頭痛不已,這些都是限制功能基因研究的瓶頸問(wèn)題。

為了克服以上問(wèn)題, 中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所胡向陽(yáng)研究組的王春濤博士與博士生孔翔祥等人員,基于TA克隆技術(shù)建立了一套全新的基因連接與克隆系統(tǒng), 這一套系統(tǒng)完全克服了傳統(tǒng)克隆過(guò)程中上述難題,而且具有操作簡(jiǎn)易、高效、穩(wěn)定等特點(diǎn)。研究組成員將這套系統(tǒng)成功地運(yùn)用到水稻與擬南芥的原生質(zhì)轉(zhuǎn)化與蛋白細(xì)胞定位方面,以及擬南芥穩(wěn)定轉(zhuǎn)化等功能基因研究。一系列的證據(jù)表明利用這套系統(tǒng)構(gòu)建的載體,目標(biāo)基因可以穩(wěn)定高效地在擬南芥中表達(dá),獲得的轉(zhuǎn)基因材料可以用于下一步的生理生化與功能分析。

上述研究結(jié)果以“A series of TA-based and zero-background vectors for plant functional genomics”為題發(fā)表在《公共科學(xué)圖書館-綜合(PLoS ONE)》上。論文鏈接http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0059576。

利用TAT克隆構(gòu)建瞬時(shí)表達(dá)載體 

瞬時(shí)表達(dá)載體在擬南芥與水稻原生質(zhì)中表達(dá)


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